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擬 南 芥 種 子

● 產(chǎn)品規(guī)格

● 產(chǎn)品說明

擬南芥(Arabidopsis thaliana) 屬于十字花科，是二年生草本植物，在生物實驗中擬南芥經(jīng)常被選擇作為模式植物，原因有三：首先，擬南芥只有5對染色體，數(shù)目很小；其次，擬南芥發(fā)育生長周期極快，在短期內(nèi)就能繁育很多代，滿足變異和進(jìn)化的要求，最后擬南芥每次生產(chǎn)數(shù)千枚種子滿足遺傳上統(tǒng)計的要求。擬南芥的基因組是目前已知植物基因組中最小的，大約為12500萬堿基對。擬南芥植株小、結(jié)子多、自花受粉，基因高度純合，并且種植方便，生長周期短，條件易得，遺傳轉(zhuǎn)化方法簡單，是進(jìn)行遺傳學(xué)研究的理想材料，被科學(xué)家譽(yù)為“植物中的果蠅”。擬南芥無菌培養(yǎng)，普遍使用的是1倍或0.5倍濃度的MS培養(yǎng)基，也有使用GamborgB5培養(yǎng)基。

● 操作方法

1. 取保存的野生型種子適量，倒入1.5ml的離心管中，加入無菌水，震蕩數(shù)次，高速離心15s，將上清及漂浮的種子棄掉。

2. 向離心管中加入1ml的 70％乙醇，震蕩10s，用移液器小心地移除上清。

3. 向離心管中加入1ml的無菌去離子水ddH2O，震蕩后吸除，重復(fù)兩次。

4. 向離心管中加入1ml的3％次氯酸鈉溶液，在渦旋振蕩器上強(qiáng)力震蕩10min，用移液器小心地移除上清。

5. 向離心管中加入1ml的無菌去離子水ddH2O，震蕩后吸除，重復(fù)3次以上。

6. 向離心管中加入500μl的無菌去離子水ddH2O，震蕩后，將種子傾倒在含有無菌濾紙的培養(yǎng)皿中。

7. 待水稍干以后，用小鑷子取擬南芥種子點(diǎn)種到已經(jīng)晾干的MS培養(yǎng)基平板上。

8. 用封口膜封好培養(yǎng)皿，寫好標(biāo)簽。

9. 將封好的平板放到4℃的冰箱2-3d，進(jìn)行春化處理，打破種子休眠期。

10. 將春化處理后的平板放入組織培養(yǎng)室（22℃-23℃），培養(yǎng)3-4d，種子即萌發(fā)。

11. 在培養(yǎng)室培養(yǎng) 7-10d，幼苗長出兩片真葉以后，即可進(jìn)行大量移栽。

● 注意事項

1. 因幼苗長出真葉后即可移栽，MS培養(yǎng)基的蔗糖含量控制在1％-2％即可。

2. 用70％乙醇進(jìn)行種子表面消毒時，時間不宜過長，因為擬南芥種皮較薄，乙醇極易滲入，殺傷種子。

3. 點(diǎn)種種子時，避免種子擠到一起，防止根交錯到一起。

4. 如果種子收獲后超過3個月，可以不用進(jìn)行春化處理。

5. 放置培養(yǎng)皿時，前幾天可以倒置放置，當(dāng)根生成后改為平放，防止根向上生長。

6. MS培養(yǎng)基可用B5培養(yǎng)基代替。